Pasożyty pakiet 4 (przywry) – test PCR

Opis

Zakres testu:

• Przywra krwi (Schistosoma haematobium)
• Przywra jelitowa (Schistosoma mansoni) NOWOŚĆ W OFERCIE
• Motylica wątrobowa (Fasciola hepatica)
• Opistorchis viverrini

Etapy badania molekularnego kału:

• izolacja materiału genetycznego (DNA) z kału
• powielenie sekwencji DNA charakterystycznych dla poszukiwanego gatunku pasożyta (reakcja RT-PCR)
• analiza wyniku

Przywra krwi – gatunek płazińca, którego żywicielem ostatecznym jest zazwyczaj człowiek. W organizmie człowieka pasożyt dożywa od 5 do 18 lat, natomiast choroba, którą wywołuje zwana jest schistosomatozą lub inaczej bilharcjozą. Dorosła postać płazińca żyje w naczyniach krwionośnych, gdzie żywi się krwią.

Zarażenie człowieka następuje przez czynne wniknięcie larwalnej postaci przywry (cerkarii) przez skórę podczas kąpieli w zanieczyszczonej wodzie (zbiorniki wody słodkiej). Cerkarie drogą naczyń krwionośnych dostają się przez serce, następnie płuca (w ciągu 48 godzin) do układu żyły wrotnej, gdzie osiągają dojrzałość płciową. Długość życia osobników dorosłych wynosi 2-18 lat. Towarzyszące chorobie objawy skórne występują zazwyczaj dwuetapowo. W pierwszym (okres inwazji) pojawia się świąd i wysypka grudkowa utrzymująca się przez kilka dni w miejscu przenikania cerkarii przez skórę. W drugim (okres ostrej toksemii) występuje pokrzywka oraz obrzęk twarzy (podczas dojrzewania pasożyta w układzie żyły wrotnej). Postaci dorosłe migrują parami w układzie krwionośnym, samica składa jaja w naczyniach włosowatych pęcherza moczowego, skąd wydostają się na zewnątrz.

Cykl życiowy przywry krwi znajdziesz tutaj.

Schistosoma mansoni – znana jako przywra jelitowa – może przebiegać w dwóch fazach: ostrą i przewlekłą. Objawy zależą od intensywności zakażenia, czasu trwania oraz reakcji immunologicznej organizmu.

Faza ostra (zespół Katayama): Występuje zwykle 2–8 tygodni po zakażeniu, gdy pasożyty zaczynają składać jaja:

• Gorączka
• Bóle brzucha (często w okolicy podbrzusza)
• Biegunka (czasem z krwią)
• Nudności, wymioty
• Uczucie ogólnego rozbicia
• Eozynofilia (podwyższony poziom eozynofilów we krwi)
• Powiększenie wątroby i śledziony (hepatosplenomegalia)

Faza przewlekła: Rozwija się przy długotrwałym zakażeniu, gdy jaja pasożyta wywołują reakcję zapalną i włóknienie w tkankach:

• Nawracające biegunki
• Krwawienia z przewodu pokarmowego
• Przewlekłe bóle brzucha
• Wodobrzusze (nagromadzenie płynu w jamie brzusznej)
• Nadciśnienie wrotne (związane z uszkodzeniem wątroby)
• Żylaki przełyku (ryzyko krwawień)
• Anemia i wyniszczenie organizmu

Do infekcji dochodzi przez kontakt skóry ze słodką wodą zawierającą larwy pasożyta (cerkarie), np. podczas kąpieli, pracy w polu, czy rekreacji w rejonach endemicznych (Afryka, Ameryka Południowa, Bliski Wschód)

Motylica wątrobowa – przywra o złożonym cyklu życiowym. Forma dojrzała pasożytuje w przewodach żółciowych wątroby roślinożerców (gł. bydła, owiec, kóz oraz niekiedy człowieka) – żywicieli ostatecznych. Jest bezwarunkowym pasożytem, co oznacza że nie może występować w formie wolno żyjącej, jedynie w ciele swojego żywiciela. Motylica wywołuje chorobę zwaną fascjolozą.

cykl życiowy motylicy wątrobowej znajdziesz tutaj.

Opisthorchis viverrini gatunek pasożytniczej przywry rozpowszechnionej w Europie, spotykanej u człowieka. Wywołuje chorobę określaną jako opistorchozę. Cykl życiowy tego pasożyta jest bardzo złożony i trwa ok. 20 lat. Zarażenie następuję przez spożycie niedogotowanej ryby zawierającej larwy. Zjedzona larwa dostaje się do dwunastnicy, gdzie za pomocą brodawki Vatera wędruje do dróg żółciowych, gdzie osiąga dojrzałość płciową. Nowe jaja składane są po ok. 3-4 tygodniach przez dorosłe osobniki zakotwiczone w błonie śluzowej dróg żółciowych lub trzustkowych. Organizm gospodarza jest zmuszony przez cały czas zapewniać pasożytowi substancje odżywcze oraz niwelować produkty ich procesów życiowych. Z drugiej strony pasożyty tłumią reakcje obronne organizmu gospodarza. W łagodnych przypadkach choroba objawia się dyspepsją, bólem brzucha, biegunkami i zaparciami. Przy dłużej trwającej inwazji pasożytniczej objawy mogą być bardziej nasilone: mogą być obecne hepatomegalia i niedożywienie. W rzadkich przypadkach rozwija się zapalenie dróg żółciowych, zapalenie pęcherzyka żółciowego i rak dróg żółciowych.

Przywrę O. viverrini znajdziemy na terenach Tajlandii, Laosu, Wietnamu oraz Kambodży.

Dzięki zastosowaniu techniki molekularnej Real-Time PCR skuteczność testu jest bliska 100%. Analiza odbywa się z 1 próbki kału.

Zalety diagnostyki chorób pasożytniczych metodą Real-Time PCR:

• wysoka czułość (4 kopie DNA w badanej próbce)
• wysoka specyficzność (pewność przynależności gatunkowej stwierdzonego pasożyta)
• wykonanie testu z 1 próbki kału, brak konieczności powtarzania badania
• możliwość wykrycia do 15 różnych pasożytów w 1 badaniu (pakiet 7)
• szybki wynik ( do 5 dni roboczych)

Wskazania do wykonania testu metodą Real-Time PCR

Obecność objawów klinicznych wskazujących na chorobę pasożytniczą mimo negatywnych wyników badania kału (metodami obserwacji mikroskopowej lub met. immunologicznymi)

Materiał do badania: kał (1 próbka), mocz (max połowa pojemnika)  możesz dostarczyć do laboratorium od poniedziałku do piątku w godzinach 08:00-16:00.

Instrukcja – jak przygotować materiał do badania 

Aby zapewnić właściwą temperaturę transportu materiału do laboratorium, po zamówieniu badania otrzymasz zestaw pobraniowy, w którego skład wchodzi m.in. pojemnik na materiał do badań, torebka izotermiczna oraz wkład chłodzący. 

———————————————————————–

Tested material: stool or other material agreed with the laboratory

Blood fluke (Schistosoma haematobium)

Liver fluke (Fasciola hepatica)

Opistorchis viverrini

 Stages of the molecular study of stool:

• isolation of genetic material (DNA) from stool
• duplication of DNA sequences characteristic of the parasite species which are looking for (RT-PCR reaction)
• result analysis

Blood fluke – a species of flatworm whose definitive host is usually human. In the human body, the parasite lives from 5 to 18 years and causes a disease called schistosomiasis or bilharziosis. The adult flatworm lives in blood vessels where it feeds on blood. Human infection occurs through active penetration of the larval form of flukes (cercariae) through the skin while bathing in polluted water (fresh water reservoirs). Cercariae pass through the blood vessels through the heart, then the lungs (within 48 hours) to the portal vein system, where they reach sexual maturity. Adult individuals live from 2 to 18 years. The accompanying skin symptoms usually occur in two stages. In the first stage (invasion period) there is pruritus (itching) and a papular rash that persists for several days at the site of penetration of the cercariae through the skin. In the second stage (the period of acute toxemia) there is nettle rash and facial swelling (during the maturation of the parasite in the portal vein system). Adult forms migrate in pairs in the circulatory system, the female lays eggs in the capillaries of the urinary bladder, from where they get outside.

Schistosoma mansoni – known as the intestinal fluke – can occur in two phases: acute and chronic. Symptoms depend on the intensity of the infection, duration, and the body’s immune response. Acute Phase (Katayama Syndrome): Typically occurs 2–8 weeks after infection, when the parasites begin laying eggs:

• Fever
• Abdominal pain (often in the lower abdomen)
• Diarrhea (sometimes with blood)
• Nausea, vomiting
• A feeling of general malaise
• Eosinophilia (increased levels of eosinophils in the blood)
• Enlargement of the liver and spleen (hepatosplenomegaly)

Chronic Phase: Develops with prolonged infection, when the parasite eggs trigger an inflammatory response and fibrosis in the tissues:

• Recurrent diarrhea
• Gastrointestinal bleeding
• Chronic abdominal pain
• Ascites (accumulation of fluid in the abdominal cavity)
• Portal hypertension (associated with liver damage)
• Esophageal varices (risk of bleeding)

Anemia and cachexia Infection occurs through skin contact with freshwater containing the parasite’s larvae (cercariae), for example, while bathing, working in the fields, or enjoying recreation in endemic regions (Africa, South America, the Middle East).

Liver fluke –  fluke with a complex life cycle. The mature form parasitizes in the bile ducts of the liver of herbivores (mainly cattle, sheep, goats and sometimes humans) – the definitive hosts. It is an unconditional parasite, which means that it cannot exist in a free-living form, only in the body of its host. The liver fluke causes a disease called fasciolosis.

Opisthorchis viverrini – a species of parasitic fluke widespread in Europe, found in humans. It causes a disease known as opisthorchosis. The life cycle of this parasite is very complex and lasts about 20 years. Infection occurs by eating undercooked fish containing larvae. The eaten larva enters the duodenum, where it travels through Vater’s papilla to the bile ducts, where it reaches sexual maturity. New eggs are laid after about 3-4 weeks by adult individuals anchored in the mucous membrane of the bile or pancreatic ducts. The host organism is forced to provide the parasite with nutrients and eliminate the products of their life processes all the time. Parasites, on the other hand, suppress the host’s defensive reactions. In mild cases, the disease manifests itself with dyspepsia, abdominal pain, diarrhea and constipation. With a longer duration of parasitic invasion, symptoms may be more severe: hepatomegaly and malnutrition may be present. In rare cases, cholangitis, cholecystitis and cholangiocarcinoma develop.

The O. viverrini fluke can be found in Thailand, Laos, Vietnam and Cambodia.

Thanks to the use of the Real-Time PCR molecular technique, the effectiveness of the test is close to 100%.

The analysis is carried out from 1 stool sample.

Advantages of diagnosis of parasitic diseases by Real-Time PCR method:

• high sensitivity (4 copies of DNA in the tested sample)
• high specificity (certainty of the species affiliation of the identified parasite)
• performing a test from 1 stool sample, no need to repeat the test
• the ability to detect up to 15 different parasites in one test (Package 7)
• quick result (up to 5 working days)

Indications for the Real-Time PCR test:

Presence of clinical symptoms suggestive of a parasitic disease despite negative stool results (by microscopic observation or immunological methods).